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GFP綠色熒光蛋白究竟用哪個波段激發(fā)?

作者:上海峰志儀器 時間:2020-05-10 18:36:09瀏覽3072 次

信息摘要:

綠色熒光蛋白在分子和細胞生物學(xué)中的應(yīng)用越來越多。由于應(yīng)用的多樣性,已經(jīng)開發(fā)出形成原始野生型綠色熒光蛋白(wtGFP)的幾種變體。這些變體中的幾個具有與wtGFP不同的激發(fā)和發(fā)射光譜。為了在定量這些GFP時獲得zui大的靈敏度,重要的是使用zui合適的激光光源。

綠色熒光蛋白在分子和細胞生物學(xué)中的應(yīng)用越來越多。由于應(yīng)用的多樣性,已經(jīng)開發(fā)出形成原始野生型綠色熒光蛋白(wtGFP)的幾種變體。這些變體中的幾個具有與wtGFP不同的激發(fā)和發(fā)射光譜。為了在定量這些GFP時獲得zui大的靈敏度,重要的是使用zui合適的激光光源。在這里,我們表征了一些常用的GFP變體的激發(fā)和發(fā)射光譜,并建議使用LUYOR-3410和LUYOR-3415便攜式熒光蛋白激發(fā)光源觀察。

wtGFP蛋白zui常用的突變可分為三類:
(1)紅移變體;
(2)像變體一樣的野生型;
(3)發(fā)出藍色光的變體。如圖1所示,以EGFP為代表的紅移變體具有一個集中在約488 nm處的單個激發(fā)峰,發(fā)射峰波長為509 nm。類似野生型的變體的主要激發(fā)峰位于395 nm,發(fā)射峰位于509 nm,而發(fā)出藍色的突變體通常在380 nm附近有一個激發(fā)峰,在460 nm附近有一個發(fā)射峰(圖1)。

GFP變體的激發(fā)波長和發(fā)射波長數(shù)據(jù)

表1. GFP變體的激發(fā)波長和發(fā)射波長數(shù)據(jù)

GFP的變體激發(fā)波長EX (nm)發(fā)射波長EM (nm)LUYOR-3415對應(yīng)波段
wtGFP395509UV
GFPuV395509UV
Stemmer395509UV
EGFP488509RB
GFP-S65T489509RB
Y66H382459UV
EBFP380460UV


LUYOR-3415RG熒光蛋白激發(fā)光源照射植物根系,GFP在植物根系的表達

GFP在植物根系的表達

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